ELISA试剂盒的温育常选用的温度有43℃、37℃、室温4℃等。37℃是试验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的适宜温度。在树立ELISA方法作反响动力学研究时，试验标明，两次抗原抗体反响一般在37℃经1～2小时，产品的生成可达高峰。为加快反响，可进步反响的温度，有些试验在43℃进行，但不宜选用更高的温度。但因所需时刻太长，在ELISA试剂盒中一般不予选用。

ELISA试剂盒实践进程操作技巧：

1）加样器应笔直参加标本，防止刮擦包被板底部，加样进程中防止液体外溅，血清残留在反响孔壁上。

2）加样器吸头要清洗干净，防止污染，加样次第要与说明书共同，否则可导致成果过错，试验重复性差。

3）在进行试验前应对试验的物理参数有充沛的了解，如环境温度、反响孵育温度和孵育时刻、洗刷的次数等，要先检查水育箱温度，ELISA试剂盒是否符合要求。

4）显色液量不行过多，加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色体系后要避光反响，显色液量不能过多，防止显色过强。

5）要确保加液量共同，在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量禁绝，造成显色不一致，判别过错。

ELISA试剂盒试验水浴保温办法： 

1、可将ELISA试板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度敏捷平衡。

2、为防止蒸腾，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，可让反响板漂浮在水面上。

3、湿盒应先放在保温箱中预温至规则的温度，特别是在气温较低的时分更应如此。

4、操作时的室温应严厉约束在规则的范围内，规范室温温度是指20～25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。

5、若用保温箱，应放在湿盒内，湿盒要选用传热性杰出的资料如金属等，在盒底垫湿的纱布，zui终将ELISA板放在湿纱布上。

6、室温温育时，只要平置于操作台上即可。

7、无论是水浴还是湿盒温育，反响板均不宜叠放，以确保各板的温度都能敏捷平衡。

8、应注意温育的温度和时刻应按规则力求。

9、为确保这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板一起测定。